人外周γδ T细胞不同亚群在活动性结核病患者的变化

【作者】 李柏青； 唐洁； 梁友宝； 陈立； 陈策； 梁华； 刘震天； 钱中清； 夏惠；

【机构】 蚌埠医学院； 免疫学教研室和免疫学实验中心； 感染与免疫安徽省重点实验室(蚌埠医学院)； 蚌埠医学院科研中心仪器中心； 蚌埠医学院病原生物学教研室；

【摘要】 研究背景:已知人γδ T细胞在抗结核分枝杆菌(Mtb)感染的免疫中承担重要作用。人γδT细胞可分为δ1至Vδ8八个亚群,以Vδ2亚群为主。根据细胞因子产生分为Tγδ1,Tγδ17细胞等亚群。但不同γδT细胞亚群在活动性肺结核病(TB)患者中有何变化尚未明了。研究目的:观察活动性TB患者外周不同γδT细胞(Tγδ1,研δ17等)亚群数量与健康人的差异,以及对Mtb耐热抗原(MtbHAg)刺激后细胞因子产生的变化,以探讨不同γδT细胞亚群在抗Mtb感染的免疫作用及其机制。方法:收集45例活动性肺TB患者和40例健康成人外周静脉血,用流式细胞术测定Tγδ9、Tγδ17和Tγδ22 T细胞的数量在γδT细胞中比例;或分离PBMC用MtbHAg或抗TCRγδ+抗CD28单抗刺激,用流式细胞术或ELISOPT测定产生IFN-γ,TNF-α和IL-17细胞的比例。部分PBMC测定γδT细胞中不同类型记忆性细胞(Tcm和Tern)的比例。结果:流式细胞术检测结果显示,活动性TB患者外周血γδT细胞中产生IL-9的Tγδ9细胞比例(2.9%)显著高于健康人组(1.1%);产生IL-17的Tγδ17细胞(5.0~10.9%)显著高于健康组(4.0~7.2%),Tγδ17细胞主要分布在Vδ3-8亚群中,并在TB患者中显著增加。活动性TB患者外周μδT细胞中产生IL-22的Tγδ22细胞比例(7.37%)显著高于健康人组(1.81%)。活动性TB结核患者Vδ1和Vδ2细胞中Tcm细胞比例降低,Tem细胞比例升高;Tcm细胞比例降低;Vδ3-8 T细胞中Tem细胞比例升高。免疫磁珠分选纯化γδT细胞后用MtbHAg刺激不能,而用抗TCRγδ+抗CD26单抗刺激后,能在极化培养后诱导出产生IL-17的Tγδ17细胞,进一步证实Tγδ17细胞以Vδ3-8的亚群为主,能激活Vδ2亚群增殖的MtbHAg不能诱导γδT细胞产生IL-17。流式细胞术和ELISPOT方法检测显示,用MtbHAG或磷酸类抗原刺激活动性TB患者PBMC后,γδT细胞中产生IFN-γ和TNF-α的Tγδ1细胞数量和比例明显低于健康人对照组。结论:TB患者外周γδT细胞中,承担保护免疫的Tγδ1细胞(IFN-γ和INF-α)受损,炎症类γδT细胞亚群(Tγδ9,Tγδ17和Tγδ22)增加,提示这些变化与TB的发病机制密切相关。更多还原