sMULT1对刚地弓形虫感染小鼠影响的初步研究

【作者】 张小燕； 方正明； 杨璐； 肖俊丽； 孙丽； 陆盛军； 刘文琪；

【机构】 华中科技大学同济医学院；

【摘要】 背景:NKG2D是NK细胞的活化型受体,而NK细胞可以通过NKG2D依赖的方式杀伤靶细胞。NKG2D配体几乎不表达于正常组织细胞表面,而在应激状态的细胞表面高表达。可溶性鼠ULBP样转录因子1(sMULT1)是NKG2D在小鼠中的配体之一,可上调NK细胞表面NKG2D受体的表达,促进NK细胞对肿瘤细胞的免疫杀伤作用,但其在弓形虫感染中的作用尚不清楚。目的:探讨sMULT1对刚地弓形虫感染小鼠免疫应答的影响。方法:BALB/c小鼠尾静脉分别注射sMULT1-AAV 8和空病毒载体GFP-AAV 8,一周后经腹腔感染50个RH株刚地弓形虫速殖子。感染第7天处死小鼠,PCR法检测全血中弓形虫529bp和B1基因的表达并观察肝脏病变情况。流式检测脾细胞中CD4~+T、CD8~+T、NK和NKT细胞的比例及NKG2D的表达和IFN-γ分泌水平;定量PCR检测肝脏中IFN-γ、TNF-α、NKG2D和IL-10的表达。结果:sMULT1转染小鼠全血中529bp基因表达下调,说明虫血症减轻;HE染色观察发现,空病毒转染小鼠的肝脏中可见大片坏死、网状纤维塌陷、肝索排列紊乱和肝细胞气球样变,且有较多炎症细胞的浸润,而sMULT1组小鼠的肝脏病变明显减轻。流式检测结果显示,sMULT转染小鼠的脾脏中CD8~+T细胞的比例升高,CD4~+T细胞的比例有所降低,但其分泌的IFN-γ水平升高。另外,NK细胞表面的NKG2D受体表达上调。定量PCR检测发现sMULT转染小鼠肝组织中IL-10和IFN-γ的表达均下调,而TNF-α和NKG2D的表达无明显变化。结论:sMULT1可以通过增强机体的Th1型免疫应答进而提高抗刚地弓形虫感染的能力。更多还原