獭兔玉米赤霉烯酮中毒的诊疗

【作者】 刘吉山； 肖跃强； 唐世云； 谢金文； 姚春阳； 田启友；

【机构】 山东省滨州畜牧兽医研究院； 山东省滨州市畜牧兽医局；

【摘要】 材料与方法(1)材料:无菌采取死亡獭兔的肝脏、脾脏、肺脏及肾脏。发病兔场饲料。培养基常规培养基。兔病毒性出血症引物:理论扩增片段长486bp。引物RHDV1:5’-CGTGCTGAGCCAGATGTA-3’;RHDV2:5’-GGTTGCAGTCCCACTATTT-3’。玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素、呕吐毒素ELISA检测试剂盒。8只体重1.2kg清洁级健康獭兔。(2)方法:细菌培养:无菌采取病死兔实质器官,无菌操作分别接种鲜血琼脂平板上,37℃,厌氧与有氧培养48h。兔病毒性出血症RT-PCR鉴定:提取病死兔兔病毒性出血症RNA,反转录合成cDNA第一链,PCR扩增,电泳检测。饲料中霉菌毒素检测:对饲料中的玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素和呕吐毒素进行检测,按说明书进行样品提取、加样、洗板、显色后,加入终止液50μL/孔,用酶标仪于450nm处的吸光度值检测。动物试验:用该批饲料饲喂家兔,连续观察21天。结果(1)细菌培养:无论在正常还是厌氧环境均无细菌菌落生长,涂片、镜检未发现细菌。(2)兔病毒性出血症RT-PCR鉴定:阳性对照扩增出486bp大小的特异性条带,未扩增出486bp大小的特异性条带。结果判为兔病毒性出血症阴性。(3)饲料霉菌毒素检测:黄曲霉毒素6.0ppb、呕吐毒素130.8 ppb,玉米赤霉烯酮1196.1ppb。玉米赤霉烯酮上限为300ppb,属于严重超标范畴。(4)动物实验:饲喂发病场的饲料的家兔出现临床症状,并死亡2只,与田间发病相同。结果与讨论未分离到细菌,排除细菌病的可能性。兔病毒性出血症PCR检测,发现核酸阴性,排除其发病可能。霉菌毒素检测结果,黄曲霉毒素6.0ppb、呕吐毒素130.8ppb,玉米赤霉烯酮1196.1ppb,玉米赤霉烯酮上限为300ppb,属于严重超标范畴。动物试验结果:饲喂发病场的饲料的家兔出现临床症状,并死亡2只,与田间发病相同结合饲料中ZEA达到1196.1ppb,属于严重超标范畴,因此确定为玉米赤霉烯酮中毒。玉米赤霉烯酮在各种谷物及饲草中广泛存在,原材料在储存过程中要妥善保存,杜绝霉菌二次生长,而产生大量毒素并污染饲料,从而引发动物中毒。更多还原