弓形虫Gra16、Gra24 DNA疫苗对Balb/c小鼠免疫保护力的研究

【作者】 张伟超； 李龙娇； 赵俊龙；

【机构】 华中农业大学农业微生物国家重点实验室； 华中农业大学动物科学动物医学学院；

【摘要】 致密颗粒蛋白作为弓形虫速殖子胞质内存在的三大细胞器之一,大多在纳虫泡形成的中后期分泌,用于改变纳虫泡内环境,调控弓形虫的生存与繁殖。Gra16与Gra24是致密颗粒蛋白家族中最新发现的可分泌至宿主细胞核内蛋白,主要影响宿主细胞新陈代谢的转录及细胞周期的调控,并产生炎性反应。本实验在对Gra16、Gra24免疫原性分析的基础上构建了pEGFP-Gra16、pEGFP-Gra24、pEGFP-Gra24’(截短)三个真核质粒。首先在BHK-21细胞上进行了真核转染,分别在核内检测到GFP荧光验证了Gra16、Gra24的核定位特性;随后的动物免疫实验显示,pEGFP-Gra16、pEGFP-Gra24、pEGFP-Gra24’三组均能引起特异的体液免疫,相较于对照组,IL-12、IFN-γ均有较大幅度的升高,尤以Gra24最显著;攻毒试验结果显示Gra24两个实验组拥有一定的免疫保护力,pEGFP-Gra24’实验组表现最优。研究结果表明Gra24可以作为疫苗候选基因。更多还原