LC-MS及NMR快速鉴定中药方剂中化学成分

【作者】 朱云祥； 王书芳；

【机构】 浙江大学药学院药物信息学研究所；

【摘要】 中药作为新药发现的重要资源,近年来一直受到学者的广泛关注,方剂是中药临床应用的主要形式,对其进行物质基础研究尤为重要。栀子甘草豉汤由栀子、甘草、豉三味药材组成,主要用于治疗伤寒引起的失眠、呼吸衰弱、心神不宁等。栀子柏皮汤由栀子、黄柏、甘草三味药材组成,具有清热解毒、利湿退黄之功效。本文以栀子甘草豉汤和栀子柏皮汤这两个仲景方为研究对象,采用LC-MS和NMR对方剂中化学成分进行了定性分析。利用LC-Q-TOF-MS提供的各成分准确分子量和LC-IT-MS提供的多级质谱碎片信息,并结合药材中已报道成分的结构信息,对方剂中成分进行结构推测和鉴定;对于LC-MS难以区分的某些同分异构体,采用基于LC-MS导向的半制备液相色谱进行少量制备,然后运用NMR解析其结构。采用该策略鉴定了栀子甘草豉汤中86个成分,包括25个三萜皂苷、22个黄酮、18个环烯醚萜、9个单萜、8个有机酸、2个二萜、1个倍半萜及1个木脂素类化合物;栀子柏皮汤中59个成分,包括23个生物碱、10个环烯醚萜、8个黄酮、7个有机酸、6个单萜、3个三萜皂苷、1个倍半萜及1个苯乙醇苷类化合物。在鉴定的成分中,有20个成分通过与标准品对照确定其结构,21个成分结构通过NMR解析进行鉴定(包括3个新化合物:两个三萜皂苷和一个黄酮类化合物)。实验结果表明,LC-MS鉴定结合LC-MS导向的半制备液相色谱制备及NMR鉴定的研究策略是辨识方剂中成分,特别是准确鉴定质谱难以区分的同分异构体结构的可行及有效的研究方法,该策略也可以用于天然产物中新化合物的快速发现和结构鉴定。更多还原