LA-PDT对HaCaT细胞增殖活性、细胞凋亡、原卟啉Ⅸ、活性氧的影响

【作者】 田黎明； 王玮蓁； 刘茜茜； 潘凯；

【机构】 华中科技大学同济医学院附属武汉市第一医院皮肤科；

【摘要】 目的:观察5-氨基酮戊酸-光动力疗法(5-aminolevulinie acid-photodynamic therapy,ALA-PDT)对HaCaT细胞增殖活性、细胞凋亡、原卟啉IX(protoporphyrin IX,PpIX)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)的影响。方法:体外培养HaCaT细胞,分成4组,对照组不加任何刺激因素,ALA组单用l mmol/L ALA溶液加入HaCaT细胞培养基中避光孵育3 h,PDT组单用红光治疗仪照射HaCaT细胞培养液30min,ALA-PDT组即在加入1 mmol/L ALA溶液于HaCaT细胞培养基中避光孵育3 h后,用红光治疗仪照射上述培养液30 min。MTT检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,荧光显微镜观察PpIX的含量以及ROS检测试剂盒检测细胞内ROS的水平。所有数据均用SPSS 13.0软件进行统计分析,多组间比较采用One-way ANOVA检验,两组间比较采用LSD-t检验。结果:对照组、ALA组、PDT组、ALA-PDT组细胞增殖活性分别为0.892±0.009、0.879±0.024、0.722±0.013、0.534±0.029,细胞凋亡率分别为(2.702±0.019)%、(2.697±0.031)%、(6.283±0.282)%、(32,601±1.897)%,ROS活性分别为(100.000±0.000)%、(101.333±3.786)%、(112.000±3.606)%、(135.000±16.000)%,各组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组和ALA组细胞内原卟啉IX(PpIX)的荧光比率分别为(4.000±1.000)%、(32.000±2.646)%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ALA诱导HaCaT细胞内PpIX的累积,PpIX在PDT作用下产生大量ROS,继而抑制HaCaT细胞增殖,导致细胞凋亡。更多还原