鸡卵黏蛋白O-糖链和N-糖链的ESI-MS分析及结构解析

【作者】 邢伟博； 王承健； 宋晶晶； 袁江北； 王仲孚； 黄琳娟；

【机构】 西北大学生命科学学院,西部资源生物与生物技术教育部重点实验室；

【摘要】 鸡卵黏蛋白(ovomucin)是鸡蛋清中的活性糖蛋白,其高粘性是维持新鲜鸡蛋胶体特性的重要因素,含量大约占卯清蛋白的2%-4%[1]。鸡卵黏蛋白包含两种亚基,α亚基(包括α1~150 kDa,α2~220kDa)含糖量为15%,β亚基(~400 kDa)含糖量大约为60%[2]。鸡卵黏蛋白因具有抗病毒、降低血清胆固醇及增强机体免疫力等重要生物活性而受到关注。由于糖蛋白的糖链部分承载着重要的生物学信息,因此解析糖链结构在糖蛋白组学研究中具有重要意义[3]。目前关于鸡卵黏蛋白糖链部分的研究比较少见,对鸡卵黏蛋白的糖链结构进行深入分析,有助于进一步认识其生物活性及机理。本研究分别采用传统的还原性β-消除法和我们发展的非还原性释放O-糖链并同时标记1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)的新方法释放鸡卵黏蛋白O-糖链,采用PNGase F酶法释放N-糖链,并借助ESI-MS,LC-MS及MS~n等技术对纯化后的鸡卵黏蛋白O糖链和N-糖链进行了分析。结果表明,鸡卵黏蛋白上共有12种O-糖链和35种N-糖链。MS~n分析显示,在所发现的O-糖链中,5种为中性糖,9种为酸性糖,其中3种被唾液酸化修饰,3种被硫酸化修饰,而其它3种同时被唾液酸化和硫酸化;在N-糖链中,27种为中性糖,8种为酸性糖,其中7种被唾液酸化,1种被硫酸化。这一研究可为进一步认识鸡卯黏蛋白的生物活性及其作用机理提供参考。更多还原