青虾卵黄蛋白原基因的克隆表达分析及眼柄摘除和RNA干扰对卵巢发育的影响

【作者】 白鸿坤； 傅洪拓； 乔慧； 李法君； 张文宜； 金舒博； 龚永生；

【机构】 南京农业大学渔业学院； 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室；

【摘要】 卵黄蛋白原(Vg)是卵黄蛋白的前体,在胚胎发育和性腺发育过程中起着营养来源的主要作用。在本研究中,采用表达序列标签(EST)和RACE技术克隆了青虾卵黄蛋白原基因的全长CDNA序列。该基因编码了2536个氨基酸,分子量是286.810 k Da。荧光定量PCR研究结果表明青虾Vg基因在雌性青虾的卵巢、肝脏和血淋巴中有很高的表达量。随着卵巢的发育,肝脏和卵巢中的Vg基因都呈现升高的趋势。与卵巢相比,肝脏内Vg基因的表达量在卵黄发生的早期上升的比较平缓,但是到达峰值的时间更短。不同发育时期Vg基因的表达模式表明它在胚胎发育时期和胚后发育阶段提供了营养来源。眼柄摘除实验通过解除性腺抑制激素GIH基因对肝脏和卵巢中Vg基因的抑制作用从而加速了卵巢的发育。在成体雌性青虾中,注射Vg ds RNA引起了卵巢和肝脏中Vg基因的表达量显著地降低,二次注射Vg ds RNA能够有效地延缓卵巢的发育。Vg RNAi能够下调卵巢中Vg R基因的表达量,表明了在卵黄生成过程中两者具有密不可分的紧密联系。更多还原