巨噬细胞对前列腺癌细胞株PC-3的作用及机制研究

【作者】 王志刚； 王姗姗； 胡银英； 徐璐； 王一帆； 黄艳琴； 袁铿； 闵卫平；

【机构】 江西省医学科学院； 南昌大学免疫与生物治疗研究所； 江西省免疫与生物治疗重点实验室；

【摘要】 目的 :研究巨噬细胞对PC-3的增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其对前列腺癌血管形成的作用,探讨其中的机制。方法:CD14+磁珠分选人外周血单核细胞后,分别诱导成巨噬细胞M1、M2、TAM以及未处理的M0亚型。高内涵细胞成像系统检测M2表面标志CD163在各亚型细胞中表达差异;定量PCR和ELISA分别检测各巨噬细胞亚型IL-6、IL-10、IL-12等细胞因子的m RNA和蛋白表达水平,同时分析其中miRNAlet-7家族的表达差异;分别使用MTT、凋亡试剂盒、划痕实验和Transwell以及体外血管形成实验检测四种巨噬细胞对PC-3的增殖、凋亡、迁移和侵袭以及促血管生成能力的影响。结果:(1)CD163在各型巨噬细胞中的阳性率:M0(47.0%),M1(14.3%),M2(79.9%),TAM(78.3%);(2)IL-1β、IL-6、IL-12、IL-23与CXCL9在M1中的表达水平显著高于M0、M2和TAM(p<0.05),而IL-10在M2及TAM中的表达显著增高(p<0.05),TGF-β在TAM上清液中显著高于其他三种亚型(p<0.05),而TNF-α则在M1的上清液中表达水平最高(p<0.05);(3)mi RNA let-7b和let-7c在TAM中的表达水平明显高于其他三种亚型(p<0.05),而let-7g在M2中表达明显增高(p<0.05);(4)M2和TAM显著促进PC-3的增殖(p<0.05)、迁移和侵袭(p<0.05)以及促血管生成能力(p<0.05)。结论 :(1)M2和TAM促进PC-3细胞的增殖、迁移和侵袭以及促血管形成能力,其作用机制可能与其特异的细胞因子表达谱相关;(2)miRNA let-7b与let-7g可能是调控巨噬细胞的极化状态,促进细胞向M2亚型转变的重要因素。更多还原