羽扇豆醇对肝癌细胞株HepG2抑制作用的研究

【作者】 王顺祥； 史帅； 杨宝明； 吴晓慧； 李建坤；

【机构】 河北医科大学第四医院肝胆外科；

【摘要】 目的:通过体内外试验,探讨羽扇豆醇对肝癌细胞增殖及凋亡的影响,明确羽扇豆醇是否具有治疗肝癌的作用。方法:1.不同浓度(20、30、40μmol/L)的羽扇豆醇作用于肝癌细胞株HepG2,分别于24h、48h、72h时,用MTT法检测药物对肝癌细胞株HepG2细胞增殖的影响。2.选用不同浓度(0、20、30、40μmol/L)的羽扇豆醇作用于肝癌细胞株HepG2 48小时后,用流式细胞术观察细胞凋亡率及细胞周期的分布。3.肝癌细胞株HepG2接种于裸鼠皮下,于成瘤7天后,随机分为4组,每组5例,用不同剂量的羽扇豆醇(0、0.25mg/只、0.5mg/只、1.0mg/只)腹腔给药,1次/2天,观察成瘤性及裸鼠状态,用药7次后测量肿瘤重量及体积。结果:1.MTT结果显示不同浓度的羽扇豆醇作用24h后,肝癌细胞株HepG2细胞抑制率分别为2.2%、6.3%、8.6%,其中30、40μmol/L组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);48h后细胞抑制率分别为4.7%、18.6%、23.4%,用药组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);72h后细胞抑制率分别为19.5%、23.1%、30.2%,用药组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);同一浓度不同时间比较,随时间延长,抑制率增加,差异有统计学意义(P<0.05)。2.FCM结果显示不同浓度羽扇豆醇作用于肝癌细胞株HepG2 48小时后,细胞凋亡率分别为1.1%,9.7%,15.4%,35.1%,用药组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);细胞周期结果显示,随各组浓度增加,S期细胞增多,分别为26.80±2.21、33.20±3.91、40.90±3.70、44.83±2.53;G2/M期减少,分别为18.16±2.45、11.74±4.36、1.98±15.43、2.37±1.16,以上各用药组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);G0/G1期变化不明显,分别为54.16±1.85、53.86±2.70、55.03±3.24、52.90±2.29,差异无统计学意义(P>0.05)。3.裸鼠体内实验:20只实验裸鼠均成活,皮下接种HepG2肝癌细胞后7天形成肉眼可见的皮下移植瘤。腹腔注射药物前肿瘤生长情况大致相同,肿瘤体积无明显差异。腹腔注射药物治疗结束后对照组、低、中、高剂量组,瘤块体积分别为(0.52±0.08)cm~3、(0.43±0.05)cm~3、(0.37±0.06)cm~3、(0.33±0.10)cm~3,瘤块重量分别为(0.49±0.08)g、(0.39±0.05)g、(0.35±0.06)g、(0.29±0.08)g。治疗结束后,用药组与对照组比较,裸鼠的瘤块体积及重量减小,差异有统计学意义(P<0.05);与低剂量组比较,高剂量组裸鼠的瘤块体积及重量减小,差异有统计学意义(P<0.05)。低剂量组、中剂量组、高剂量组的抑瘤率分别为20.40%、28.57%、40.81。结论:羽扇豆醇对肝癌细胞株HepG2细胞具有抑制生长、促进凋亡作用,其作用具有浓度和时间依赖性。腹腔注射羽扇豆醇对裸鼠皮下肝移植瘤具有抑瘤作用,在临床治疗肝癌上存在应用前景。更多还原