G6PD缺乏男性半合子及其母亲的表型与基因型研究

【作者】 肖奇志； 周玉球； 谢建红； 张永良； 肖鸽飞； 汪国庆；

【机构】 珠海市医学遗传研究所； 珠海市妇幼保健院检验中心；

【摘要】 目的通过分析6-磷酸葡萄糖脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase.G6PD)缺乏男性半合子及其母亲的表型与基因型的关系,验证Lynon假说的正确性并为遗传咨询提供实验证据。方法通过连续采样法,收集144家G6PD缺乏男性半合子及其母亲的血液标本,荧光斑点试验和四氮唑蓝(NBT)法分别用于G6PD缺乏症的筛查和红细胞中G6PD酶活性定量,然后再采用反向点杂交(reverse dotblot,RDB)和基于探针熔解曲线分析(probe meltingcurve analysis,PMCA)的荧光PCR技术进行中国人16种已知G6PD基因突变检测,对于罕见的或未知的G6PD基因突变则通过DNA测序分析以确定其基因型。在此基础上,再分析G6PD酶活性和基因型间的关系。结果G6PD荧光斑点试验结果为中度至重度缺乏的男性半合子,其G6PD酶活性为1.10～8.58NBT单位/gHb(M为2.57NBT单位/gHb,95%CI:1.39～4.7 NBT单位/gHb)、G6PD/6PGD比值为0.10～0.75(M为0.23,95%CI:0.15-0.55)。其母亲的G6PD酶荧光班点试验结果则表现为正常到完全缺乏,G6PD酶活性为1.44～31.20 NBT单位/gHb(M为16.78 NBT单位/gHb,95%CI:2.22～27.83 NBT单位/gHb)、G6PD/6PGD比值为0.12～2.25(M为1.53,95%CI:0.22～2.21),G6PD酶活性呈现连续性分布。G6PD缺乏男性半合子除了2例外,余均检出G6PD基因突变(98.61%)。对于其母亲G6PD酶活性正常者(86.11%),仅检出单条X染色体上有G6PD基因突变;但为重度缺乏时(13.89%),则可检出两个致病基因。结论G6PD基因突变是引起男性G6PD缺乏的直接原因。G6PD缺乏男性半合子之母亲则表现出X连锁不完全显性遗传的特征。若两条X染色单体上同时携有G6PD基因突变时,则表现为重度缺乏;女性杂合子表现为G6PD酶活性正常的比例非常高,似此Lyon的X染色体随机失活假说不符。更多还原