稳定转染金属调理素-1对胃癌细胞SGC-7901侵袭能力的影响

【作者】 杨中印； 瞿颖； 魏敏； 朱正纲； 刘炳亚； 顾琴龙；

【机构】 上海交通大学医学院附属瑞金医院外科上海消化外科研究所；

【摘要】 目的:构建pEGFP-金属调理素-1(MPS-1)真核表达载体,体外转染至SGC-7901胃癌细胞,观察MPS-1转染后MPS-1蛋白表达,并检测SGC-7901细胞侵袭能力的变化。方法:聚合酶链反应(PCR)扩增MPS-1全长255 bp的编码序列,将PCR扩增产物连接入pEGFP-C1载体,经测序确认序列无误后成功构建pEGFP-MPS-1真核表达载体。采用Lipofectamine 2000转染SGC-7901胃癌细胞株’用浓度为2.Og/L的G418筛选2周后得到外源性MPS-1稳定表达的SGC-7901细胞并扩增。Western blot法检测MPS-1的表达,Transwell实验检测pEGFP-MPS-1过表达后对胃癌细胞侵袭能力的影响。结果:得到外源性MPS-1稳定表达的胃癌细胞株,Western blot显示外源性MPS-1在胃癌SGC-7901细胞中表达成功,而且,pEGFP-MPS-1过表达后胃癌细胞的Transwell实验显示pEGFP-MPS-1过表达细胞组相对于空载组和空白组的侵袭指数分别为2.10±0.25比1.00±0.00和2.10±0.25比0.85±0.22(P〈0.05),提示MPS-1稳定表达后胃癌细胞的侵袭能力增加。结论:pEGFP-MPS-1的稳定表达增加了胃癌细胞SGC-7901的侵袭能力。更多还原