环孢素A体内抗日本血吸虫的实验研究

【作者】 胡奇丰； 柳建发；

【机构】 浙江宁波大学医学院；

【摘要】 目的:日本血吸虫病是由日本血吸虫寄生在门静脉系统所引起的疾病。人和动物都可能通过皮肤接触含尾蚴疫水而感染,主要病变为肝与结肠由虫卵引起的肉芽肿。在我国发病区域广阔,危害严重。而环孢素A不仅是临床使用的免疫抑制剂,还具有广谱抗寄生虫作用,有望成为一种新的抗血吸虫病药物。因此我们对环孢素A体内抗日本血吸虫的作用做了初步研究。方法:长爪沙鼠随机分组,每组12只,每鼠感染120±2条尾蚴,成功建立血吸虫病动物模型。然后分别于第一周和第三周连续5天给予三种不同剂量(10,20,50 mg/kg·d)的环孢素A治疗,5周后解剖沙鼠,经门静脉灌注收集成虫,计数虫荷,计算减虫率;扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)观察虫体表面损害情况。制作肝脏和结肠病理切片,进行组织病理学观察:HE染色观察虫卵肉芽肿大小,Masson染色观察肝脏纤维化程度,免疫组化检测Ⅰ型胶原和碱性成纤维细胞生长因子的表达情况。结果:HE染色结果显示,高剂量组虫卵肉芽肿面积显著小于中、低剂量组,肝组织细胞损害较小,而低剂量组与模型组相比没有明显改变;第三周用药比第一周用药效果更好。Masson染色显示低剂量组肝脏有纤维化形成,中剂量组不明显,而高剂量组几乎没有。免疫组化均为阴性结果,初步认为沙鼠饲养时间较短,肝脏纤维化程度不高,相关抗原未表达。也可能为实验操作问题,需进一步实验研究。应用扫面电镜可观察到正常雄、雌虫体体壁表面呈海绵状,具有明显而复杂的褶嵴、凹窝、体棘和感觉乳突。用药后雄、雌虫体体壁表面破损严重,低剂量组可见表皮皱缩,凹凸不平;高剂量组则表皮溃烂,伴有大面积的脱落。透射电镜可见雌、雄虫体体壁产生大量空泡产生,体表细胞结构紊乱,细胞核变形,线粒体肿胀。结论:环孢素A在体内可使虫体受损或致死,具有明显的杀日本血吸虫作用,并且高剂量组作用效果比中、低剂量组更显著,杀成虫的作用又优于杀童虫作用,但具体的杀虫作用机制并不清楚,需要我们运用流氏细胞术和激光共聚焦显微镜等技术手段进行更深入的研究。更多还原