叶下珠复方Ⅱ号对肝星状细胞凋亡和miR-16/Bcl-2表达的影响

【作者】 李常青； 赵敏； 李小翚；

【机构】 广州中医药大学热带医学研究所； 广州中医药大学中药学院；

【摘要】 目的:观察叶下珠复方Ⅱ号体外对肝星状细胞（HSC-T6）凋亡和miR₁6/Bcl-2表达的影响,进一步探讨叶下珠复方Ⅱ号抗肝纤维化的作用机制。方法:体外培养HSC_T6细胞,分为对照组、叶下珠复方Ⅱ号高剂量组（3.60mg/ml）、中剂量组（1.80mg/ml）和低剂量组（0.9mg/ml）,采用MTT法检测药物对HSC-T6细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡的变化,SYBR染料法实时荧光定量PCR检测药物处理后HSC-T6细胞miR-16和Bcl-2 mRNA表达的改变,Western Blot法测定Bcl-2蛋白的表达变化。结果:叶下珠复方Ⅱ号处理HSC-T6细胞后,高、中、低各剂量组对HSC-T6细胞增殖均有明显的抑制作用,随着叶下珠复方Ⅱ号浓度的增加,细胞的凋亡率也逐渐增加;叶下珠复方Ⅱ号各处理组miR₁6的表达显著增加,呈现明显的剂量-效应关系,且Bcl-2mRNA和蛋白质表达明显减少,与对照组比较,差异均具有显著性意义（P<0.01）。结论:叶下珠复方Ⅱ号能显著抑制HSC-T6细胞增殖和诱导其凋亡,其作用机制与提高miR-16的表达,抑制其靶基因Bcl-2的表达有关。更多还原