P16和c-Myc基因启动子区域甲基化在辐射诱导小鼠胸腺淋巴发瘤生中的作用

【作者】 孙世龙； 于雷； 刘永哲； 鞠桂芝；

【机构】 吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室；

【摘要】 辐射作为已知的致突变和致癌因子可引起表观遗传学效应已被大量的研究所证实。在辐射增加基因组不稳定性和诱发肿瘤的过程中,DNA甲基化的研究自然也成为辐射学者的关注热点。p16基因位于9号染色体短臂,其蛋白由148个氨基酸构成,是细胞周期依赖激酶抑制因子的一员。p16通过抑制Rb蛋白的磷酸化阻断细胞周期G1-S的进程。c-Myc是Mye家族中的一员,最早发现于禽类骨髓瘤病毒MC29中,位于人8号染色体长臂上(8q24),由3个外显子和2个内含子组成。目前研究发现,c-iyc参与了人类以及动物细胞的恶性转化,在多种恶性肿瘤中都有c-Myc基因过表达现象。p16和c-Myc基因作为已知重要的抑癌和癌基因,在肿瘤研究中备受关注。目的:观察p16和c-Myc基因启动子区域CpG岛甲基化的变化,结合其蛋白表达变化,分析启动子区域CpG岛甲基化对候选基因功能的影响,并寻找受CpG岛甲基化所影响的转录因子。方法:X射线全身照射建立小鼠胸腺淋巴瘤动物模型。BSP的方法检测候选基因启动子区域CpG岛甲基化的改变情况,Western-blot方法检测候选基因的蛋白表达。结果:在辐射诱导的小鼠胸腺淋巴瘤细胞中,p16基因启动子区域CpG岛处于高甲基化状态。c-Mye基因启动子区域CpG岛处于低甲基化状态。在p16基因启动子区域,胸腺淋巴瘤与正常胸腺细胞相比,所检测的23个CpG位点中,第10及第11个CpG位点的DNA甲基化发生率均明显增高,具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。c-Mye基因在正常对照组中第3和第16个CpG位点发生了DNA甲基化,而胸腺淋巴瘤组中未发现DNA甲基化位点。同时与对照组比较,辐射诱导的小鼠胸腺淋巴瘤细胞中p16蛋白表达明显降低,c-Myc蛋白表达明显增高。结论:在辐射诱导的小鼠胸腺淋巴瘤动物模型中,肿瘤细胞p16基因启动子区域CpG岛处于高甲基化状态,c-Myc基因启动子区域CpG岛处于低甲基化状态。p16蛋白表达明显降低,c-Mye蛋白表达明显增高。更多还原