激酶Dyrk1A抑制剂EGCG对tau外显子10可变剪接的影响

【作者】 尹晓敏； 钱慰； 靳娜娜； 张兰； 刘飞； 李林；

【机构】 江苏省神经再生重点实验室； 首都医科大学宣武医院药物研究室 北京市老年病医疗研究中心 神经变性病教育部重点实验室；

【摘要】 目的:探讨激酶Dyrk1A抑制剂-表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）-对微管相关蛋白tau基因外显子10可变剪接的影响。方法:在HEK293FT共转染mini-tau基因与和Dyrk1A或无激酶活性的Dyrk1A_K188R、或Dyrk1A的siRNA,用RT-PCR检测tau外显子10的编码;在维甲酸诱导分化的人神经前体细胞中,不同浓度的EGCG处理细胞24小时,用RT-PCR和Western blot检测3R-tau和4R-tau的表达变化。结果:（1）Dyrk1A促进3R-tau表达。在HEK293T细胞中,过表达Dyrk1A明显的抑制tau外显子10的编码,即3R-tau表达增加。SiDyrk1A作用于HEK293FT细胞,则明显观察到3R-tau表达受抑制,4R-tau水平增高。（2）EGCG促进4R-tau的表达。人神经前体细胞经全反式维甲酸诱导分化后,可表达3R-tau和4R-tau,用不同浓度的EGCG处理24小时,发现Dyrk1A表达水平下降,并计算4R-tau和3R-tau的比值,发现其比值随着EGCG浓度升高,说明EGCG促进tau外显子10表达。结论:激酶Dyrk1A在细胞内抑制tau外显子10编码,导致3R-tau水平增加;绿茶提取物EGCG作为激酶Dyrk1A的抑制剂,通过抑制Dyrk1A表达从而促进4R-tau水平增加。为tau可变剪接紊乱相关疾病如Pick病的药物开发利用提供新思路。更多还原