三种地黄提取物对体外培养的肝细胞保护作用研究

【作者】 叶(目亭)杰； 孙祝美； 李华； 王晓玲；

【机构】 上海中医药大学生物教研室；

【摘要】 目的:地黄是防治肝纤维化有效药物一贯煎的君药,本研究通过不同提取方法得到地黄的三种提取物,以研究提取物对过氧化损伤肝细胞的保护,为寻找一贯煎抗肝损伤的有效物质提供基础。方法:分别以纯水、75%乙醇、95%乙醇提取地黄得到三种提取物。体外培养HL-7702肝细胞经过氧化氢损伤,CCK-8比色检测细胞活力、毒性,荧光法检测Caspase-3/7活性和MDA含量,Annexin V及PI双荧光流式细胞术检测细胞凋亡,DNAfragmentation检测细胞的DNA状态。结果:地黄水提物、75%乙醇提取物和95%乙醇提取物在浓度为50μg/m1,100μg/ml,200μg/ml及300μg/ml时均对细胞活力无显著影响。过氧化氢损伤2小时后,肝细胞活力显著降低,而1μg/ml,10μg/m1,25μg/ml及50μg/ml的提取物均可显著提高细胞活力。肝细胞经H₂0₂作用后,细胞内的caspase3/7活性明显增加、凋亡比例增加、DNA 1adder smear条带增加,而三种地黄提取物均可抑制caspase3/7活性、降低细胞凋亡的比例、减少smear条带。过氧化氢损伤2小时后,细胞MDA含量显著升高,而三种地黄提取物均显著降低MDA的含量。结论:三种地黄提取物均可保护过氧化氢引起的肝细胞凋亡,其机制与地黄的抗氧化作用有关。更多还原