PRRSV感染PAM中猪FcγRⅢ介导的免疫抑制反应

【作者】 杨青原； 秦运杰； 王冬梅； 杜东颖； 夏平安； 杨明凡； 崔保安；

【机构】 河南农业大学牧医工程学院兽医微生物实验室；

【摘要】 为了研究猪FcγRⅢ介导猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)免疫抑制反应,本研究采用将含有200个TCID50的PRRSV、脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)(100ng/mL)和纯化鼠抗猪FcγRⅢ IgG(550μg/ml)分别处理PAM细胞;同时用纯化鼠抗猪FcγRⅢIgG(550μg/ml)处理PAM细胞后接种含有200个TCID50的PRRSV,并设健康细胞对照组。各组分别培养12h、24h、36h、48h、60h、72h后收集细胞及上清,用已经建立的绝对荧光定量PCR方法检测接毒组PAM细胞中不同时间段内PRRSV复制水平,用相对荧光定量PCR检测各组PAM细胞中IFN-α、TNF-αmRNA转录水平。结果显示,PRRSV在感染PAM细胞后12-24h期间PRRSV促进IFN-α的mRNA水平,36-72h期间PRRSV抑制IFN-α的mRNA水平,之后IFN-α的mRNA水平恢复正常;TNF-αmRNA水平在感染后12h-72h均略微上调。LPS处理PAM细胞后,IFN-α、TNF-α的mRNA水平均上调。用纯化鼠抗猪FcγRⅢ IgG处理猪PAM后,选择性激活猪PAM细胞表面FcγRⅢ,数据显示IFN-α、TNF-αmRNA水平显著下调,表明猪FcγRⅢ信号途经能够抑制宿主细胞的先天性抗病毒免疫反应;PRRSV感染选择性激活猪PAM细胞表面FcγRⅢ后显著抑制抗病毒因子IFN-α、TNF-α的转录水平,说明FcγRⅢ能够抑制PRRSV感染后的抗病毒免疫反应。更多还原