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人α-LA真核表达载体的构建及其在猪成纤维细胞的表达
【作者】 李艳玲； 王颖； 党文庆； 郝柱； 徐宁迎； 张金枝；
【机构】 浙江大学动物科学学院；
【摘要】 为了构建人α-乳清蛋白(α-lactalbumin,α-LA)真核表达载体,将其转染至猪的成纤维细胞,获得稳定高表达人α-LA的细胞,本研究根据猪基因密码子偏爱性优化并合成人α-乳清蛋白基因序列,并将其定向克隆入pIRES2-ZsGreen1真核表达载体,脂质体介导转染猪的成纤维细胞,G418抗性筛选后通过荧光观察和RT-PCR方法检测目的蛋白的表达。结果表明,重组载体pIRES2-ZsGreen1-opLA成功构建,并获得稳定转染的成纤维细胞。本实验获得了稳定表达人α-乳清蛋白的猪成纤维细胞,为进一步生产转基因克隆猪提供了供体细胞。
【基金】 国家转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX08006-003和2009ZX08006-009B)
- 【会议录名称】 “生泰尔”杯全国养猪技术征文大赛——中国畜牧兽医学会养猪学分会五届三次理事会暨生猪产业科技创新发展论坛论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会养猪学分会五届三次理事会暨生猪产业科技创新发展论坛
- 【会议时间】2012-08-01
- 【会议地点】中国吉林长春
- 【分类号】S828
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会养猪学分会(Pig Branch of China Association of Animal and Weterinary Medbicine)