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MGB(Minor Groove Binder)复合探针二重实时定量PCR检测大肠杆菌O157
【作者】 朱向玲； 严亚贤； 陆承平； 刘佩红； 王建； 沈莉萍；
【机构】 上海交通大学农业与生物学院； 南京农业大学动物医学院； 上海市畜牧兽医站；
【摘要】 以大肠杆菌O157rfbE和stx2为待检靶基因,设计两对引物和两条MGB探针,rfbE和stx2探针5’端分别用FAM和VIC基团标记,3’端均用Taqman-MGB标记。建立并优化了检测大肠杆菌O157的二重荧光定量PCR方法,可检测的最低DNA浓度是101拷贝/uL;试验中O157菌株检测结果均为rfbE阳性,而非O157菌株检测结果均为阴性;重复性实验中,批间差异小于80%,批内差异小于70%。实验结果显示此二重荧光定量PCR方法可对分离的可疑大肠杆菌O157菌株进行快速鉴定,同时得知菌株是否携带stx2毒力基因,有利于菌株毒力强弱的判定。
【基金】 上海市科技兴农重点攻关项目(No.:沪农科攻字(2004)第11-4号)
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会
- 【会议时间】2007-09-20
- 【会议地点】中国江西井冈山
- 【分类号】S855.12
- 【主办单位】解放军军事医学科学院军事兽医研究所、江西省畜牧兽医局