鸡补体分子C3d的基因克隆及序列分析

【作者】 章振华； 李永清； 谌南辉； 周雪媚； 徐福洲； 王宏俊； 陈小玲；

【机构】 江西农业大学动物科学院； 北京市农林科学院畜牧兽医研究所； 中国农业大学动物医学院；

【摘要】 根据已发表的人、猩猩、鼠、野兔、猪、奶牛、绵羊动物的C3d基因同鸡的C3α链进行序列比较分析,发现在鸡的C3α链上有一段约897bp序列同上述动物有较高的同源性,在上下端保守区域设计一对引物788bp,应用RT-PCR扩增鸡C3d部分基因,并克隆到pMD18—T载体,测序正确后再在上下端分别设计一对引物,理论长度为378bp和336bp,最后用三种PCR产物延伸扩出C3d全长。结果成功获得鸡C3d基因重组质粒pMD18—C3d,序列分析表明所获的鸡C3dcDNA全长为993bp,编码331个氨基酸。分析鸡与上述动物C3d编码的氨基酸同源性分别在59.6%—67.7%和54.5%—61.9%之间,而哺乳动物核苷酸和氨基酸同源性则在74.2%-100%和72.2%-100%之间,由此表明补体因子C3d的基因具有种间多样性。进化树反映出鸡的补体因子C3d与其它哺乳动物的亲缘关系较远,在进化关系上为一单独分支。更多还原