脾源鸭干扰素γ-基因的RT-PCR扩增、序列分析及表达

【作者】 张晓宇； 李凤华； 邵钢； 宋晓林； 陈艳； 康丽娟； 江庆国； 庄国宏； 江国托；

【机构】 大连三仪生物工程研究所； 大连轻工业学院生物工程学院；

【摘要】 本研究从丝裂原刺激的鸭脾淋巴细胞中提取基因组RNA,采用RT-PCR扩增鸭干扰素γ基因并进行了序列分析。序列分析结果表明,鸭干扰素γ基因序列全长477bp,开放阅读框架内401个核苷酸,共编码132个氨基酸。将鸭γ-IFN基因定向克隆到原核表达载体pBV220中,重组质粒经酶切鉴定后,转化到宿主菌DH5a中,温度诱导表达,SDS-PAGE分析,表达产物与标记抗鸡干扰素抗体出现Dot-ELISA阳性反应。更多还原