神经干细胞移植改善脑挫裂伤大鼠神经功能及其对BFGF表达的影响

【作者】 王旭阳； 鲁祥和； 李晓莉； 曾博； 叶盛； 张宇； 吴近森； 郑伟明； 诸葛启钏；

【Author】 Department of Neurosurgery,Brain Research Center,the First Affiliated Hospital, Wenzhou Medical College,Wenzhou,325000,China Xu-Yang Wang Xiang-He Lu Bo-Zeng Sheng Ye Yu-Zhang Jin-Sen Wu Wei-Ming Zheng Qi-Chuan Zhuge Institute of Neural Regeneration Medicine,Brain Research Center,the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College,Wenzhou,325000,China Xiao-Li Li

【机构】 Department of Neurosurgery,Brain Research Center,the First Affiliated Hospital, Wenzhou Medical College； Institute of Neural Regeneration Medicine,Brain Research Center,the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College；

【摘要】 目的观察神经干细胞(NSCs)移植对脑挫伤大鼠神经功能恢复的影响及对BFGF表达的调节。方法 24只SD大鼠随机分为3组:假手术组、手术组和NSCs移植组。采用自由落体撞击建立大鼠皮质运动区脑挫伤模型,将培养纯化并鉴定的NSCs于术后当天移植入损伤位点周围;术后0d、3d、7d、14d行改良神经功能缺失表(NSS)评分,观察动物运动和平衡功能缺损与恢复情况;14天时取脑组织用免疫荧光技术检测hochest标记的移植NSCs在体内存活、迁移和分化情况;用神经元核蛋白(NeuN)、生长相关蛋白(GAP-43)抗体检测并计数宿主神经元存活和局部轴突再生;用RT-PCR技术和蛋白质印迹技术检测bFGF基因表达水平。结果与假手术组比较,脑挫伤组大鼠于脑挫伤后即出现不同程度的抽搐、瘫痪和平衡功能的缺失,神经功能缺损评分明显升高,并随时间推移有所降低,而NSCs移植组的NSS评分至第7天后与单纯手术组比较有明显降低,有显著差异(P<0.01)。Hochest标记免疫荧光,移植NSCs能在宿主脑组织存活,并向四周迁移。免疫组化染色显示NSCs移植组NeuN阳性细胞和GAP-43阳性纤维数量分别较手术组明显增多(P<0.01)。RT-PCR和蛋白质印迹技术检测显示大鼠脑挫伤14天后,NSCs移植组较单纯手术组bFGF基因表达显著增高(P<0.05)。结论移植NSCs能在挫伤脑组织存活、迁移,并明显促进bFGF表达,增加宿主神经元存活与局部轴突再生,改善脑挫伤大鼠神经功能。该研究结果为临床应用NSCs移植治疗脑外伤提供了重要的实验证据。更多还原