VEGF165基因修饰外周血血管内皮祖细胞促进血管新生

【作者】 吕海涛； 孙凌； 张建敏； 曹磊； 严文华； 谢宇锋； 盛伟华； 杨吉成； 李红霞； 韩莲花； 杨向军；

【机构】 苏州大学附属儿童医院心血管内科； 苏州大学细胞与分子生物学教研室； 苏州大学附属第一人民医院心血管内科；

【摘要】 <正>目的拟构建携带血管内皮细胞生长因子165(VEGF165)基因的腺病毒载体,转染兔血管内皮祖细胞(EPCs),并观察靶细胞转染后目的基因的表达水平。方法(1)通过PCR法以pSV-K3-VEGF165质粒为模板扩增VEGF165基因,将目的基因酶切连接到带有GFP标记的pAdTrack-CMV质粒上,构建重组转移质粒pAdTrack-CMV-VEGF165,经PCR、酶切和测序鉴定后将其Pmel线性化与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1共转化BJ5183细菌,获得重组腺病毒载体pAdeasy-1-pAdTrack-CMV-VEGF165,经Pacl线性化后转染QBI-293A包装细更多还原