疫胶体金试纸条快速检测黄瓜细菌性白枯病菌

【作者】 孙艳秋； 赵奎华； 曹远银； 刘长远；

【机构】 沈阳农业大学植物保护学院； 辽宁省农业科学院植物保护研究所；

【摘要】 黄瓜细菌性白枯病是近年来在辽宁、山东、黑龙江等省保护地黄瓜上出现的一种为害较重的细菌性新病害,调查结果表明,该病害发病率一般达10%～20%,严重地块达40%以上。该病主要为害叶片,田间症状为病斑圆形或近圆形,中间白色膜质,四周具晕圈,病部未见菌脓。在生产上由于黄瓜细菌性角斑病菌、圆斑病菌、叶斑病菌也可引起类似的症状,很难区分,不易正确识别而延误防治。为了准确识别和及时防治黄瓜细菌性白枯病,建立一种方便、简单、快速、准确的诊断方法对病害的早期监控具有重要意义。本研究采用双抗体夹心免疫层析技术,建立了黄瓜细菌性白枯病菌[Pseudomonas viridiflava(Burkholder 1930)Dowson 1939]的免疫胶体金试纸条快速检测法。通过柠檬酸三钠还原法制备胶体金标记黄瓜细菌性白枯病菌多克隆抗体(CAb),将CAb-胶体金复合物包被在胶体金结合垫上,将羊抗兔二抗和CAb包被在硝酸纤维素膜上,分别作为质控线(C)和检测线(T),组装成试纸条。该试纸条对唐菖蒲疮痂病菌(Pseudomonas fluorescens biovarⅡ)等26个菌株无交叉反应,特异性强,检测灵敏度为10~6cfu/ml,检测时间为15min。稳定性试验表明试纸条在37℃条件下放置15d可保持检测结果的可靠性。用试纸条对田间采集的病叶进行检测,C线和T线清晰可见,缓冲液对照呈阴性反应。研制的试纸条具有快速、简便、特异性强的优点,适合生产上黄瓜细菌性白枯病菌的现场快速检测。更多还原