初级感觉神经元血管内皮生长因子及其受体在神经病理痛中的作用研究

【作者】 林加日； 徐昌水； 李桂林； 梁尚栋； 李欣； 刘晗；

【机构】 南昌大学基础医学院生理学教研室；

【摘要】 研究报道P2X₃和P2X_2/3受体涉及初级感觉神经介导的神经病理痛。血管内皮生长因子（VascularEndothelialGrowth Factor,VEGF）在神经病理痛病理变化过程中的作用尚不清楚。本研究目的是探讨VEGF及其受体（flk-1）在神经病理痛中的作用。建立大鼠坐骨神经结扎损伤模型。实验大鼠随机分为三组:假手术组（Ⅰ）,神经病理痛模型（Ⅱ）和抗VEGF抗体治疗神经病理痛模型组（Ⅲ）。Ⅰ和Ⅱ组大鼠鞘内注射注入PBS,Ⅲ组鞘内注射抗VEGF抗体。每隔两天测量机械缩足反射阈值（MWT）和热缩足反射潜伏期（TWL）的变化,14天后取大鼠脊髓L4-6背根神经节,通过免疫组织化学、蛋白印迹分析、原位杂交和RT-PCR方法检测L4-6背根神经节（DRG）P2X₃、P2X_2/3、VEGF和flk-1的表达。结果表明Ⅱ组的MWT和TWL均明显低于Ⅰ组和Ⅲ组（P<0.05）;免疫组化显示Ⅱ组L4-6DRG的P2X₃、P2X_2/3、VEGF和flk-1的光密度值均高于Ⅰ组和Ⅲ组（P<0.01）;蛋白印迹分析表明L4-6 DRG的P2X₃、P2X_2/3、VEGF和flk-1的蛋白表达均明显高于Ⅰ组和Ⅲ组（P<0.01）;原位杂交检测显示Ⅱ组L4-6DRG的P2X₃、P2X_2/3、VEGF和flk-1的mRNA光密度值均高于Ⅰ组和Ⅲ组（P<0.01）;RT-PCR检测显示Ⅱ组L4-6 DRG的P2X₃、P2X_2/3、VEGF和flk-1的mRNA表达均高于Ⅰ组和Ⅲ组（P<0.01）。而Ⅰ组和Ⅲ组的MWT、TWL及L4-6 DRG的P2X₃、P2X_2/3、VEGF和flk-1的mRNA和蛋白表达量均无显著差异性（P>0.05）。实验结果表明,VEGF可协同P2X₃和P2X_2/3受体参与神经病理痛的发病。更多还原