马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液及CNQX对正常大鼠脑内及培养的神经元内NSF的影响

【作者】 李忠玉； 刘庆莹； 朱长庚； 王伟；

【机构】 华中科技大学同济医学院解剖学系；

【摘要】 目的揭示星形胶质细胞对神经元内N-乙基顺丁烯二酰亚胺敏感性的融合蛋白(N-ethylmaleimide-sensitivefusionprotein,NSF)和AMPA受体的影响及其在癫痫发病中的作用。方法将马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液(astrocyte-conditioned medium,ACM)注入正常SD大鼠侧脑室,观察其行为变化;运用免疫组织化学方法观察其大脑皮质、海马内NSF免疫反应的变化;将培养的神经元随机分为对照组、ACM组及CNQX+ACM组,免疫细胞化学方法观察NSF表达的变化,Western blotting法检测NSF含量的变化。结果 ACM组大鼠在注射后30min出现癫痫行为。免疫组织化学染色结果显示:(1)ACM作用后2 h及4 h,大鼠大脑皮质及海马内NSF免疫反应阳性神经元数和平均吸光度明显降低(P<0.05);(2)培养神经元的免疫细胞化学染色结果显示ACM组在作用4h及8h时NSF免疫阳性反应产物与对照组比较明显减少(P<0.05)。Westernblotting:NSF含量在ACM作用4 h及8 h时较对照组及CNQX+ACM组明显减少(P<0.05).结论ACM可下调神经元内NSF的表达,并导致动物痫性发作。而运用AMPA受体拮抗剂CNQX则能阻断其下调作用,提示ACM对NSF的下调作用可能是与AMPA受体有关。更多还原