丹参、血府逐瘀汤含药血清促体外培养兔BMSc动员的实验研究

【作者】 王云开； 欧阳长生； 魏云峰； 王梦洪； 郑泽琪； 彭景添； 彭小平； 黄绍烈；

【机构】 南昌大学第一附属医院心血管内科；

【摘要】 目的体外提取、分离、纯化兔骨髓间充质干细胞,观察丹参(Salvia miltiorrhiza)、血府逐瘀汤(Xuefuzhuyu soup)含药血清对其增殖、迁移的影响,以及服药前后血清SDF-1浓度的变化。方法新西兰大耳兔24只随机分为空白对照组、丹参组和血府逐瘀汤组(下简称血府组),每组8只,灌胃法喂服动物中药水煎液,分别给予蒸馏水、丹参水煎液和血府逐瘀汤水煎液7天,并于服药前后抽取动脉血提取血清;使用密度梯度离心法、贴壁筛选法分离、培养兔BMSCs,倒置显微镜下连续观察细胞形态变化,利用甲基偶氮唑盐(MTT)法绘制BMSCs生长曲线,流式细胞仪行细胞表面标记物;TRANSWELL迁移实验系统观察各组含药血清对BMSCs迁移情况,MTT法测定BMSCs倍增时间;ELISA法测定血清SDF-1浓度。结果 1、利用密度梯度离心法可成功培养BMSCs,培养的BMSCs经流式细胞仪显示:CD34+细胞为0.8%,CD44+细胞、CD29+细胞分别为86.5%和99.6%。;2、空白对照组、丹参组、血府组BMSCs的倍增时间(54.27±7.2)h、(47.35±4.2)h、(48.12±3.98)h.与对照组比较,丹参、血府组与空白对照组比较均有显著差异(P<0.05),丹参和血府组二者差异无统计学意义(P>0.05);3、空白对照组、丹参组、血府组迁移细胞数分别为11±6、18±5、20±4,与对照组比较,丹参组和血府组差异有统计学意义(P<0.05);4、空白对照组、丹参组、血府组服药前后血清SDF-1浓度比较,空白对照组(P>0.05)、丹参组(P<0.05)、血府逐瘀汤(P<0.05)。结论 1、体外培养的兔BMSCs一般形状、细胞表面标记符合BMSCs特征,增殖活性良好;2、丹参和血府逐瘀汤含药血清均能促进体外培养的兔BMSCs的迁移;3、丹参和血府逐瘀汤含药血清均能显著促进体外培养兔BMSCs的倍增。4、丹参和血府逐瘀汤二者的促进体外培养的兔BMSCs动员作用差异无显著性。更多还原