油菜2个谷胱甘肽过氧化物酶基因的克隆及其在非生物胁迫下的表达

【作者】 胡茂龙； 龙卫华； 高建芹； 陈新军； 张洁夫； 陈松； 浦惠明； 戚存扣；

【机构】 江苏省农业科学院经济作物研究所国家油料作物改良中心南京分中心；

【摘要】 谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione Peroxidases,GPX)是植物在非生物胁迫下细胞抵御活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)伤害的关键酶类。本研究利用RT-PCR技术从甘蓝型油菜宁油16号(Brassicanapus L.)中克隆了2个GPX基因,分别命名为BnGPX1、BnGPX2(GenBank登录号:HM130680,HM130682)。BnGPX1的ORF长度为711bp,推测编码蛋白含有236个氨基酸,分子量为26.10kDa,等电点为9.37;BnGPX2的ORF为510bp,推测编码169个氨基酸,分子量为18.96kDa,等电点为5.60。BnGPX1、BnGPX2都具有GPX特有的3个典型结构域及Cys残基。通过常规PCR方法克隆到BnGPX1、BnGPX2基因组序列(GenBank登录号:HM130681,HM130683),序列分析发现两基因都由6个外显子和5个内含子组成,所有内含子的剪切位点均符合真核生物GT-AG规则,这些结构特征与拟南芥ATGPX1、ATGPX2基因极其相似。半定量RT-PCR法检测两基因在油菜不同组织及非生物胁迫下的表达发现,BnGPX1和BnGPX2在油菜所有器官中都表达,在叶和花中表达量高,角果中表达量较低。BnGPX1在盐、干旱和高温胁迫下表达量升高,BnGPX2在湿害和干旱胁迫下表达量有所升高,但出现峰值的时间不同,而两基因对低温胁迫基本都没有响应,以上表明这2个基因受到不同胁迫处理诱导表达。更多还原