转基因高油酸甘蓝型油菜新种质研究

【作者】 陈松； 张洁夫； 浦惠明； 申爱娟； 陈峰； 龙卫华； 胡茂龙； 周晓婴； 戚存扣；

【机构】 江苏省农业科学院经济作物研究所；

【摘要】 高油酸植物油在加工和储存过程中不易被氧化,是氢化油的理想替代品。油酸能降低人体低密度脂蛋白,维持高密度脂蛋白的水平,能有效预防动脉硬化等心脑血管疾病的发生。富含油酸的植物油一直被认为是有利于健康的最佳烹调用油。提高油酸含量已成为油菜品质改良的目标之一。转基因是获得高油酸油菜种质的重要途径。油酸脱饱和酶(FAD2)是决定植物种子油酸含量的关键酶。通过转基因技术(共抑制、反义RNA或RNAi技术),能有效抑制fad2基因表达,从而达到提高油酸含量的目的。江苏省农科院经济作物研究所油菜育种研究室成功将油菜fad2基因反向重复序列表达框通过农杆菌介导途径转入甘蓝型油菜,获得转基因植株W-4。目前已经获得转基因T4代种子。经过气相色谱分析,转基因油菜种子油酸含量高达80%以上,亚油酸、亚麻酸分别减低至4%和3%左右。对获得的6个基本世代的种子脂肪酸组成分析和苗期kan抗性检测,结果显示转基因高油酸性状和卡那霉素抗性均表现出受一对显性基因控制的孟德尔遗传规律,与核酸杂交显示的1个拷贝数的转基因整合相吻合;对T2、T3、T4代种子油酸含量分析结果表明转基因高油酸性状能够稳定遗传;荧光定量PCR检测了油菜角果发育时期籽粒中fad2基因的表达量,结果显示:转基因油菜开花后的3-4周种子中的fad2基因表达量较非转基因对照下降了50%以上,说明转基因成功诱导了fad2基因的转录后基因沉默;另通过TAIL-PCR方法获得转基因插入位点左右旁测序列。其中右边界旁侧序列291个碱基,A+T含量为68.73%;左边界旁侧序列365个碱基,A+T含量为67.40%,显示转基因整合位点位于基因组中A+T丰富的区域。更多还原