定向进化技术提高α-半乳糖苷酶的转糖基效率

【作者】 范树泉； 赵晗； 卢丽丽； 肖敏；

【机构】 山东大学微生物技术国家重点实验室国家糖工程技术研究中心；

【摘要】 <正>来源于短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)203的α-半乳糖苷酶Aga2能够专一性水解α-半乳糖苷键,同时具有一定的转糖基能力,生成含Gal-α-1,4键的糖苷缀合物。本研究通过易错PCR在aga2中引入随机突变,以期提高Aga2的转糖基能力。经过一轮易错PCR,将突变基因库进行重组表达,以蜜二糖为反应底物,通过TLC和HPLC检测转糖基产物的比例,获得了一株转糖基活性提高的突变酶Aga2-RM92。以蜜二糖为底物反应时,相对于Aga2,突变酶Aga2-RM92的转糖基效率由22.3%提高到58.3%,水解活力降为Aga2的53%。更多还原