高效液相色谱串联质谱法同时测定人血浆三苯双脒代谢物氨脒和乙酰氨脒浓度及其药代动力学

【作者】 袁桂艳； 曲婷婷； 王本杰； 魏春敏； 张蕊； 郭瑞臣；

【机构】 山东大学齐鲁医院临床药理研究所； 德州市食品药品监督管理直属分局；

【摘要】 目的建立高效液相色谱串联质谱（HPLC-MS）法同时测定人血浆中氨脒和乙酰氨脒浓度,并考察其人体药代动力学特征。方法以乙腈-0.01 mol·L^-1醋酸铵（含0.3%氨水）=80:20（V/V）为流动相,采用Ultimate XB-C₁₈色谱柱（150 mm×4.6mm,5μm）,流速0.8 ml·min^-1,柱温25℃,进样量10μl,API-ES源,正离子模式,喷雾气（N₂）压力50 psi,干燥气（N₂）流速11.0 L·min^-1,干燥气温度为350℃,毛细管电压4000 V,选择性监测质荷比（m/z）为178（氨脒）、220（乙酰氨脒）和370（氨磺必利,内标）,碎片电压均为110 V。8名健康志愿者单次口服400 mg三苯双脒肠溶片,于药前（0 h）和药后0.5,1,2,3,3.5,4,4.5,5,6,8,12,24和36 h抽取肘静脉血4 ml,5000 rpm离心5 min,取血浆-20℃保存,备测,采用DAS2.0程序计算药代动力学参数。结果氨脒和乙酰氨脒分别在1～800 ng·ml^-1和0.5～500 ng·ml^-1浓度范围内线性关系良好,回归方程分别为Y=0.1881X+0.0092和Y=0.6658X+0.0155,最低定量限为1 ng·ml^-1和0.5 ng·ml^-1,绝对回收率为81.47%～84.05%和83.64%～86.71%,相对回收率为100.89%～101.41%和97.88%～110.68%,批内、批间变异（RSD）均小于8%,-20℃冷冻24 h及7 d和反复冻融稳定,RSD均小于8%。志愿者单次口服400 mg三苯双脒肠溶片后,氨脒和乙酰氨脒的半衰期t_1/2分别为5.38±2.15和（7.09±2.06）h,达峰时T_max5.25±1.25和（7.13±2.42）h,峰浓度c_max449.38±136.41和（148.30±117.13）ng·ml^-1,药-时曲线下面积AUC_0～364655.04±1113.24和（1904.93±976.81）ng·ml^-1·h,AUC_0～∞分别为4768.90±1158.38和（1989.49±1014.42）ng·ml^-1·h。结论本文建立的HPLC-MS法操作简单,灵敏度高,重现性好,符合化学药品人体药代动力学研究指导原则要求,适于人体内氨脒和乙酰氨脒血浓度测定及药代动力学研究。健康志愿者单次口服三苯双脒肠溶片400 mg,代谢物氨脒和乙酰氨脒体内药代动力学过程均符合w=1/cc的一室模型,吸收、分布迅速。更多还原