旱稻中干旱胁迫诱导蛋白DIP3的鉴定

【作者】 郭晓丽； 王大伟； 白丽荣； 时丽冉； 王道文； 李慧敏； 赵凤梧；

【机构】 衡水学院； 中国科学院遗传与发育生物学研究所； 河北省农林科学院旱作农业研究所；

【摘要】 利用20%PEG6000进行室内模拟干旱胁迫,对旱稻65及旱稻/稗草//高粱杂交后代植株在三叶一心期进行胁迫处理5h,以上述各个材料的水培植株为对照。对供试材料的叶片及根组织进行全蛋白提取,并双向电泳分析。分析电泳结果后发现,无论旱稻65还是杂交后代材料中,根和叶在蛋白表达数量及蛋白分布范围上都有很大的区别,在此基础上我们鉴定出了二十多种表达量上存在明显差异的蛋白点。选取十个差异表达蛋白进行MALDI-TOFMASS分析,经网上数据库比对后发现一种差异表达蛋白与水稻中一预测的功能未知蛋白高度相似,我们将该蛋白命名为DIP3(Drought Induced Protein 3)。DIP3属于干旱胁迫诱导蛋白,在旱稻及杂交后代植株的对照样品中表达量均较低,PEG6000胁迫后表达量剧增。通过设计特异引物,利用旱稻的RNA样品进行RT-PCR,获得了编码该蛋白的cDNA序列。通过生物信息学分析后发现,此cDNA所编码的预测蛋白产物中含有一个N端信号肽序列和一个几丁质酶(EC 3.2.1.14)Ⅲ的高度保守区域。DIP3为干旱胁迫相关基因,其在旱稻植株的正常生长发育以及耐逆反应等方面的功能值得进一步深入研究。更多还原