黑麦中新发现的小B染色体形成机制的研究

【作者】 陈成彬； 王春国； 宋文芹；

【机构】 南开大学生命科学学院；

【摘要】 本试验通过连续三年对经染色体鉴定含B染色体的黑麦种子（黑麦JNK居群）进行保种繁殖和随后连续追踪研究中发现,在一些含B染色体种子的繁殖后代中新出现了一对小的B染色体。染色体观察显示,这对小B染色体多数情况下可与大B染色体共存于同一细胞。这对小B染色体是如何形成的?是否和已经存在的B染色体有共同的形成机制?作者利用显微分离技术和荧光原位杂交技术对黑麦中新发现的小B染色体形成机制进行了一系列探究。首先分离了10条小B染色体,利用其LA-PCR扩增产物进行比较原位杂交分析。结果表明,小B染色体微切扩增产物与A染色体及大B染色体均有杂交信号,其中杂交信号在A染色体上主要分布于着丝粒附近,大B染色体上信号在其短臂及着丝粒附近均有较强的信号均匀分布,而其长臂末端未有信号。推测小B染色体可能来源于大B染色体的长臂末端缺失,随后利用已报道的大B染色体长臂末端特异序列D1100和E3900与同时含有小B染色体和大B染色体的细胞进行FISH分析。结果显示,D1100和E3900杂交信号只出现在大B染色体的长臂末端,而在小B染色体上未检测到杂交信号。进一步确定小B染色体缺失了大B染色体的长臂末端。为进一步证实这个推论,利用已筛选获得的着丝粒特异探针RB183与小B染色体进行FISH杂交。结果表明,小B染色体与大B染色体一致,在着丝粒处显示出比A染色体更加强烈的杂交信号。随后以简单重复序列（ACC）₅为探针的FISH结果也证实小B染色体与大B染色体信号分布模式一致。一系列研究结果均表明,小B染色体和大B染色体有较高的相似性,其不同可能就在于小B染色体缺失了大B染色体的长臂末端,这极有可能是新形成的小B染色体的主要形成机制。而对于已经存在的B染色体其形成机制是否也是如此,还有待于深入探究。更多还原