应用液相基因芯片技术检测食品中弓形虫和旋毛虫的研究

【作者】 杨朋欣； 张子群； 路义鑫； 韩彩霞； 李晓云； 宋铭忻；

【机构】 东北农业大学动物医学学院； 黑龙江出入境检验检疫局；

【摘要】 为建立一种可以同时检测食品中弓形虫和旋毛虫的液相基因芯片方法,本研究以弓形虫B1基因和旋毛虫18S rDNA基因为研究对象,设计并合成特异性探针和引物,通过PCR方法扩增目的片段并测序,建立一种基于双重PCR的液相基因芯片检测方法。结果显示,在188 bp和92 bp处分别扩增出目的条带;测序结果与GenBank登录的弓形虫和旋毛虫的相关基因一致性分别为99.47%和100%;液相基因芯片对单重PCR产物和双重PCR产物的检测结果一致,特异性和重复性好;该方法检测弓形虫和旋毛虫变异系数(CV%)均在7%以内;灵敏度分别为65.6 ng/mL和39.06 ng/mL,比琼脂糖凝胶灵敏约8倍;模拟污染试验准确率达98%以上。本研究建立的液相基因芯片检测食品中弓形虫和旋毛虫的方法具有高效、灵敏和特异等优点,为食源性寄生虫的检测和监控提供了新方法。更多还原