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副猪嗜血杆菌“菌影”的制备
【作者】 胡明明； 常月红； 张艳禾； 司薇； 谢芳； 于申业； 刘慧芳； 刘思国； 王春来；
【机构】 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点试验室/动物细菌病研究室； 东北农业大学；
【摘要】 本试验通过PCR扩增噬菌体PhiX174的裂解基因E,将该基因连接到含有λP_I/P_R-cI857启动阻遏系统的pBV220载体中,从而使裂解基因E和启动阻遏系统λP_I/P_R-cI857串联成为温度敏感的裂解盒,构建重组质粒pBV-E。再将含有E基因的裂解盒插入到pMD18-T载体中,构建副猪嗜血杆菌打孔质粒。采用电击穿孔法将其转入E.coliβ2155中,然后利用接合的方式将打孔质粒转入副猪嗜血杆菌5型菌株。含有打孔质粒的副猪嗜血杆菌在28℃条件下生长到对数生长期,然后升温到42℃诱导E基因的表达,制备了副猪嗜血杆菌菌影。电镜观察菌影形态完整,内容物全部被释放到胞外。本试验为进一步研究菌影这一新型菌苗及佐剂形式奠定了基础。
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会
- 【会议时间】2010-08-01
- 【会议地点】中国黑龙江哈尔滨
- 【分类号】S858.28
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会、中国免疫学会兽医免疫分会