体外诱导mESCs分化为心肌样细胞的实验研究

【作者】 相荣科； 赵菊； 吴波； 刘笑然； 穆祥； 张涛； 高建明；

【机构】 北京农学院动物科学技术学院； 北京市兽医学(中医药)重点实验室；

【摘要】 【目的】观察淫羊藿苷(Icariin,ICA)、小鼠心微血管内皮细胞(Mouse heart microvascular endothelial cells,hMVECs)条件液诱导小鼠胚胎干细胞(Mouse embryonic stem cells,mESCs)定向分化为心肌样细胞的效果。【方法】以mESCs分化培养液为空白对照组,分别添加10-7 mol/L ICA、50%hMVECs条件液、10-7 mol/L ICA联合50%hMVECs条件液为实验组,诱导mESCs分化,对诱导后继续培养1周的mESCs,采用免疫细胞化学法鉴定诱导后细胞中肌钙蛋白T(cTnT)表达,并计算心肌样细胞分化率;采用RT-PCR鉴定诱导后mESCs中心肌特异性基因MLC-2v、α-MHC、β-MHC、Nkx2.5、GATA-4的表达。【结果】各实验组诱导后细胞中均有心肌特异性蛋白cTnT表达;且诱导后细胞有心肌特异性基因MLC-2v、α-MHC、β-MHC、Nkx2.5、GATA-4表达。其中淫羊藿苷组(44.35±3.84)和联合诱导组(44.19±1.17)极显著高于hMVECs条件液组(5.46±1.24)。(P<0.01)【结论】ICA与hMVECs条件液均可在体外诱导mESCs定向分化为心肌样细胞,二者联合未能提高心肌样细胞分化率。更多还原