低氧条件下小鼠成纤维细胞中HIF-1α/PTEN的表达及对细胞周期的影响

【作者】 赵丹； 邹小君； 唐嘉茵； 刘东华； 刘慧雯；

【机构】 哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室；

【摘要】 PTEN基因（即第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因）的失活能够通过某种分子机制诱导HIF-1α的表达。本实验采用胰酶消化法原代培养小鼠成纤维细胞,传至第3代,血清饥饿培养24 h后,将细胞分为低氧实验组（2%O₂+98%N₂）和常氧对照组。将低氧组放置于低氧培养箱内培养0、2、4、6、8 h,流式细胞仪检测不同低氧时间对细胞周期的影响。同时,采用免疫细胞化学方法检测不同低氧条件下小鼠成纤维细胞中HIF-1α和PTEN的表达。结果显示,细胞增殖速度较同期对照组明显减慢（P<0.01）,G1期随着低氧时间增长,百分比逐渐增加,细胞被阻滞于G0-G1期（P<0.01）,G2/M期与S期比例明显下降（P<0.01）,细胞周期转换时间延长,减慢细胞的分裂与增殖。此外,随着低氧时间增长细胞数量逐渐减少,形态发生改变,变短回缩。PTEN主要定位于细胞浆,少数位于胞核和核周。随着低氧时间增长,PTEN的表达逐渐减弱,而HIF-1α的表达逐渐增强。提示出,在适宜的低氧条件下,低氧微环境可以使细胞出现一个显著的G1期细胞周期阻滞。低氧条件对于PTEN在成纤维细胞中的表达有抑制作用,HIF-1α与PTEN在低氧条件下的表达呈负相关。更多还原