猴精子糖基化蛋白质组学研究

【作者】 吴亦波； 郭雪江； 王静； 于春梅； 季维智； 周作民； 沙家豪；

【机构】 南京医科大学；

【摘要】 人类精子含有许多糖基化蛋白,这些蛋白对于维持精子的正常生理功能,特别是对精卵识别,顶体反应和精卵融合是至关重要的。糖基化蛋白质修饰谱的构建可以部分阐明精子上哪些糖蛋白在受精过程中发挥重要作用,而且大部分糖蛋白的寡糖基团由于暴露在细胞外,可以作为临床应用的药物靶标。目前对于精子的糖基化修饰谱的研究还非常有限。而恒河猴是目前从进化上与人类最接近的模式动物,对恒河猴精子的研究能更好的阐明人类精子的功能,也能为以后临床开发新药提供实验模型。本研究即以灵长类动物恒河猴作为动物模型,分选其精子,抽提蛋白后行全蛋白酶解,之后用混合凝集素将糖基化的肽段富集,糖肽酶孵育酶切以后,通过先进的LTQ-Orbitrap质谱我们成功鉴定了228个糖基化位点。生物信息学分析结果显示,大部分糖基化蛋白位于顶体和线粒体膜上,并且主要参与微管运动和蛋白水解等生物学事件,结果提示这些糖基化的蛋白主要参与受精过程中的顶体反应,精卵融合。对于猴精子糖基化修饰谱的鉴定为深入研究男性不育提供了理论依据,并且为男性避孕和男性不育提供了候选的药物靶标。更多还原