P0蛋白及其抗体作为慢性正己烷中毒的生物标志物的研究

【作者】 赵磊； 刘清君； 郑玉新；

【机构】 中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所；

【摘要】 背景:近年来,慢性正己烷中毒逐渐成为我国发病率最高的职业中毒之一,其毒性主要由代谢产物2,5-己二酮（2,5-hexanedione,2,5-HD）引起,中毒者主要表现为中毒性周围神经病,目前缺乏特异度高,灵敏性好,易检测的生物标志物。P₀蛋白是周围神经系统髓鞘上的一种主要结构蛋白,对维持髓鞘结构的稳定性发挥了极其重要的作用。目的:探讨P₀蛋白及其抗体在不同剂量,不同时间2,5-己二酮暴露后的改变水平,验证P₀蛋白及其抗体作为慢性正己烷中毒的效应标志物的可行性。内容研究一:分别经口给予Wistar大鼠0、50、100、200、400mg/kg不同剂量的25-己二酮,每周进行一次步态评分,4周后取材,采用甲酰胺法和免疫荧光法,评价坐骨神经血神经屏障通透性改变状况,利用RT-PCR法和免疫印记法分别检测坐骨神经中P₀ mRNA和P₀蛋白的改变水平,采用酶联免疫法检测外周血中P₀蛋白及其抗体的改变水平。研究二:经口给予Wistar大鼠400mg/kg的2,5-己二酮,每周取材一次,采用免疫组化技术观察不同染毒时间大鼠坐骨神经横断面P₀蛋白表达水平,并采用酶联免疫法检测外周血中P₀蛋白抗体的改变水平。结果:随着染毒剂量的加大和染毒时间的延长,大鼠的中毒症状逐渐加重,体重增加趋势逐渐减缓或降低,步态评分分值增大;利用甲酰胺法检测坐骨神经中Evans-blue后发现,血神经屏障通透性随着染毒剂量的加大逐渐增高;随着染毒时间的延长,坐骨神经横断面P₀蛋白表达水平有逐渐降低的趋势,外周血中P₀抗体的检出率也呈现明显的增加趋势（χ²-=11.7,P<0.05）。结论:正己烷代谢产物2,5-己二酮能够改变大鼠周围神经血神经屏障的通透性,破坏髓鞘结构,使坐骨神经中P₀蛋白的水平降低,外周血中P₀蛋白抗体水平增高。P₀蛋白抗体有可能成为慢性正己烷中毒的生物标志物。更多还原