核糖体展示技术筛选Nogo-66拮抗性小分子多肽

【作者】 陈金荣； 杨成； 石磊； 刘巍； 崔勇； 徐芳；

【机构】 滨州医学院；

【摘要】 <正>目的:采用核糖体展示技术初步筛选能与Nogo-66特异性结合的多肽,探讨Nogo-66拮抗性小分子多肽的作用机制。方法:体外人工合成引物和含36个随机序列的寡核苷酸,通过2轮PCR构建随机DNA文库,随后体外进行偶联的转录和翻译,得到含随机12肽的核糖体文库,并利用含随机12肽的核糖体文库对Nogo-66进行初步筛选,并用ELISA的方法检测筛选到的多肽与Nogo-66的亲和力。结果:成功构建含12肽的核糖体文库,经过10轮筛选,得到了可与Nogo-66结合的氨基酸序列,合成相应的多肽NGPA,同时合成对照多肽NGPB。ELISA结果显示,NGPA与Nogo-66的亲和力明显高于NGPB与Nogo-66的亲和力(P<0.05)。结论:成功地得到与Nogo-66高亲和力的配体分子NGPA,为脊髓损伤的再生和修复提供了新的治疗方法。更多还原