【作者】 丁小玲； 袁东智； 于海礼； 方明； 刘芳； 何亚平； 张金虎； 岳利民；

【机构】 四川大学华西基础医学与法医学院生理教研室； 成都市计划生育技术指导所； 成都大学医护学院；

【摘要】 采用RNA干扰技术进一步探讨孕激素依赖的cyclin G1是否介导了孕激素对子宫内膜上皮细胞增殖的负调控作用。随机选取18只成年雌性昆明小鼠,于双侧卵巢切除术后第12天,连续两天皮下给予雌激素(1μg/mL,0.1 mL),然后将其中10只,随机分为两组,实验组于末次注射雌激素后24 h皮下注射孕激素(20 mg/mL,0.1 mL),对照组皮下注射同等剂量的溶剂,24 h后处死小鼠,用免疫组织化学染色法比较子宫内膜上皮细胞中cyclin G1的表达差异,结果显示仅雌激素预处理后再给予孕激素的小鼠子宫内膜上皮细胞呈高表达,进一步验证cyclin G1在子宫内膜上皮细胞中的表达具有孕激素依赖的特点。余下8只小鼠的其他操作同前,但在孕激素注射前5 h,实施RNA干扰,即用脂质体转染法将特异性的cyclin G1-siRNA和control-siRNA分别注入同一小鼠的两侧子宫腔中,处死小鼠后,分别用RT-PCR和免疫组化比较双侧子宫内膜上皮细胞中cyclin G1的表达,同时检测比较反映细胞增殖活性的增殖细胞核抗原(PCNA)的表达;应用流式细胞术检测双侧子宫内膜上皮细胞的细胞周期进程的变化。结果显示:与对照侧相比,cyclin G1mRNA和cyclin G1蛋白表达均明显降低,PCNA蛋白的表达却明显增强,处于G1期的细胞百分数明显减少,S期的细胞百分数明显增加,G2/M期的细胞百分数却无明显改变。据此推论:cyclin G1至少部分介导了孕激素对子宫内膜上皮细胞增殖的负调控作用。更多还原