人参皂苷Rb₃对血管紧张素Ⅱ致心肌细胞肥大的影响

【作者】 韩冬； 曲绍春； 于晓风； 睢大筼；

【机构】 吉林大学药学院药理学教研室；

【摘要】 目的西洋参叶20S-原人参二醇皂苷（PQDS）是由五加科人参属植物西洋参（Panas Quinquefolium）茎叶总皂苷分离纯化的二醇组分,其中人参皂苷单体Rb3（Ginsenoside Rb₃,G-Rb₃）约占40%。为开发此单体皂苷,本文在整体实验基础上进一步研究G-Rb₃对血管紧张素Ⅱ致心肌细胞肥大的影响。方法原代培养乳鼠心肌细胞,加入G-Rb₃ 0、12 5、25、50、100、200、400、800、1000μg·mL¹,作用48h观察不同浓度G-Rb₃对正常心肌细胞存活率的影响;原代培养乳鼠心肌细胞,分为正常对照组、肥大模型组、G-Rb₃ 50、100、200μg·mL¹组。AngⅡ1×10⁷ mol/L诱导心肌细胞肥大,同时加入药物,培养48h后,倒置相差显微镜下记录心肌细胞形态学变化及表面积,收集细胞,BCA蛋白定量试剂盒测定各组心肌细胞总蛋白质含量;荧光分光光度计测定细胞内钙离子含量;Western Blot观察ANP、β-MHC、CaN,p-ERK1/2,ERK1/2,p-PKCδ,PKCδ蛋白表达情况。结果①G-Rb₃ 800、1000μg·mL¹组细胞存活率明显降低,其它组细胞存活率无改变;②与正常对照组相比,肥大模型组心肌细胞融合更为紧密,伪足粗大,自主搏动振幅大,速率快,表面积明显增加。G-Rb₃ 100μg·mL¹、200μg·mL¹心肌细胞融合略紧密,伪足较大,搏动振幅与速率正常对照组心肌细胞相当,细胞表面积明显减小;③与正常对照组相比,肥大模型组的细胞总蛋白含量明显增加。G-Rb₃ 100μg·mL¹、200μg·mL¹均能明显降低总蛋白含量;④与正常对照组相比,肥大模型组的细胞内钙离子含量明显加。G-Rb₃ 100μg·mL¹、200μg·mL¹均能明显降低钙离子含量。⑤与正常对照组相比,肥大模型组ANP、β-MHC、CaN,p-ERK1/2,p-PKCδ蛋白表达明显增强。G-Rb₃100μg·mL¹、200μg·mL¹ANP、β-MHC、CaN,p-ERK1/2,p-PKCδ蛋白表达减弱。结论 G-Rb₃能缩小心肌细胞表面积,降低心肌细胞总蛋白质含量,减少心肌细胞肥大标志物ANP、β-MHC蛋白的表达,减少CaN,p-ERK1/2,p-PKCδ信号转导通路蛋白表达。提示G-Rb₃抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大可能与抑制CaN,ERK1/2,PKC等信号转导通路有关。上述结果进一步确证G-Rb₃是PQDS的主要有效成分,有可能开发成防治心肌梗死后心室重构的创新药物。更多还原