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棉花线粒体atp9基因的克隆和转录研究

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【作者】 史计张锐石庆华张晓王远孙国清孟志刚周焘郭三堆

【机构】 中国农业科学院生物技术研究所/农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程新疆农业大学农学院

【摘要】 为了深入探讨棉花的雄性不育分子机理,本试验以三系杂交棉胞质雄性不育系P30A、保持系P30B和恢复系Y18为材料,通过Tail-PCR从可育胞质获得线粒体atp9基因序列1627bp。利用Northern blot分析了atp9基因在棉花幼蕾的转录情况,利用RT-PCR分析确定atp9基因编码区的大小。结果显示:在三系中atp9基因均存在两个转录本,一个0.5kb的强杂交带和一个1.0kb的弱杂交带,杂交结果在三系中无明显差异。比对分析atp9基因的DNA序列和cDNA序列的结果表明:三系中atp9基因编码区共有7个编辑位点,第7个编辑位点密码子由于编辑转变为终止密码子使翻译提前终止。同时具体分析了atp9基因在棉花三系幼蕾中各编辑位点的编辑频率。结果显示:atp9基因在保持系中幼蕾的编辑频率要明显低于不育系和恢复系。本研究首次分析了棉花线粒体atp9基因在三系中的转录编辑情况,发现atp9基因的编辑与棉花胞质形式相关,而且不同的核背景也会影响编辑率,我们推测线粒体atp9基因与棉花的胞质雄性不育具有一定的相关性,但有待更进一步验证分析。

【关键词】 棉花线粒体atp9基因Tail-PCRNorthern blotRNA编辑
  • 【会议录名称】 中国棉花学会2011年年会论文汇编
  • 【会议名称】中国棉花学会2011年年会
  • 【会议时间】2011-08-07
  • 【会议地点】中国安徽安庆
  • 【分类号】S562
  • 【主办单位】中国棉花学会
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