5-氮杂-2’-脱氧胞苷逆转人低分化鼻咽癌细胞系RASSF1A基因甲基化作用研究

【作者】 姚运红； 邓岩； 胡新荣； 高洪彬； 唐泽立；

【机构】 广东医学院病理教研室；

【摘要】 目的观察RASSFlA基因在鼻咽癌细胞系(CNE 2Z)中甲基化和表达情况及去甲基化305-氮杂-2-脱氧胞苷对RASSFlA基因甲基化和表达及对CNB-2Z细胞生物学的影响。方法采用5-氮杂-2-脱氧胞苷处理CNE-2,通过甲基化特异性PCR检测药物处理前后RASSFlA基因的甲基化程度的改变,免疫细胞化学观察RASSFlA基因表达的改变。通过细胞生长曲线、平板克隆形成实验检测细胞生长活性改变。通过流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果CNE-22细胞系存在RASSFlA基因高甲基化、低表达。CNE-22经,H5-氮杂-2-脱氧胞苷处理后,与对照组相比,用药3天后,高甲基化的RASSFlA基因转化为部分甲基化,RASSFIA基因表达水平开始增高,至第四天出现低甲基化,RkSSF5在第四、第五天表达明显升高。细胞生长慢,克隆形成率显著降低,凋亡率增高。停药2天后,∞保持低甲基化、高表达、低生长和高凋亡率。结论鼻咽癌细胞株CNE-22细胞RASSFlA基因无缺失,但呈高甲基化和低表达状态。5-氮杂-2-脱氧胞苷对cNE-22细胞的RASSFlA基因有去甲基化作用,使RASSFlA基因表达增高并发挥抑制生长,促进凋亡的作用。基因一旦去甲基化,停药后也能发挥肿瘤抑制作用。更多还原