人抗乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)Fab噬菌体抗体库的构建、筛选及鉴定

【作者】 张爱华； 闭兰； 赵亚杰； 端义坤； 余模松；

【机构】 武汉生物制品研究所；

【摘要】 <正>主要内容:本课题采用基因拼接(splicing overlapping extension,SOE)的方法,以pComb3H-SS噬粒为载体,构建了一个库容量为4×105的人抗乙型肝炎病毒表面抗原Fab噬菌体抗体库,从所构建的文库中获得了系列特异性的抗-HBsAg的Fab噬菌体抗体分子并对其进行了基因水平、蛋白质水平的分析鉴定。结果显示,所获得的Fab抗体分子全为人的抗体基因,且只与HBsAg产生特异性反应。从本论文的系列实验中,作者得出如下结论:第一,采用基因拼接方法构建抗体文库可以提高文库的多样性;第二,可以很方便地从库容量较小的免疫抗体文库中获得抗原特异性的人抗体基因。更多还原