反义寡核苷酸抑制人恶性黑素瘤A375细胞survivin mRNA及其蛋白的表达

【作者】 王梅； 王冰； 谭升顺；

【机构】 西安交通大学医学院第二附属医院皮肤科；

【摘要】 目的:研究survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人恶性黑素瘤A375细胞survivin mRNA及蛋白表达的影响。方法:人工合成survivin ASODN,脂质体介导转染人恶性黑素瘤细胞株A375,采用原位杂交、免疫组化SP法检测survivin mRNA及其蛋白表达的变化。结果:转染24h后,原位杂交显示ASODN组A375细胞survivin mRNA表达较对照组显著下调,用图像分析系统对阳性染色的强度(灰度值)进行半定量测定,对照组平均灰度值为109.8±12.8,而ASODN处理组为188.6±8.2,两组经独立样本t检验差异有统计学意义(P<0.001)。(P<0.01);转染48 h后,免疫组化染色显示经survivin反义寡核苷酸处理后,A375细胞胞浆内染色强度明显减弱,对照组平均灰度值为111.6±8.8,而ASODN处理组为186.0±9.3,两组经独立样本t检验差异有统计学意义(P<0.001)。结论:Survivin ASODN可下调A375细胞survivinmRNA的表达和survivin蛋白水平。为survivin ASODN治疗恶性黑素瘤提供理论依据。更多还原