心脏上酸敏感离子通道(ASICs)的表达促成pH敏感通道的形成

【作者】 胡壮丽； 宋建人； 黄超； 王芳； 陈建国；

【机构】 华中科技大学同济医学院药理系；

【摘要】 目的ASICs是新近发现并克隆的配体门控型离子通道,易被细胞外H~+激活,在神经系统的生理和病理过程中发挥重要的作用。我们以往的研究已证明ASIC1与学习记忆有关。而目前越来越多的报道开始关注神经以外其他组织中ASICs的表达和功能,但心脏中是否也有ASICs的表达还不得而知。方法本文应用RT-PCR、western blotting、免疫荧光和全细胞膜片钳技术,分别从心肌组织和细胞探讨不同亚型ASICs的存在及电生理特性。结果①应用RT-PCR方法,分别以小鼠皮质和三叉神经节为阳性对照,结果提示:成年大鼠心肌组织和乳鼠心肌细胞都存在有ASICs mRNA,包括ASIC1、ASIC2a和ASIC3。②继续应用western blotting的方法和相应的阳性对照,同样在成年大鼠心肌组织和乳鼠心肌细胞上观察到ASIC1、ASIC2a和ASIC3的蛋白表达。③组织免疫荧光和细胞免疫荧光均显示明显的ASIC1、ASIC2a和ASIC3的表达,其分布各具特点:ASIC1以胞核为主,ASIC2a在胞膜、胞浆和胞核中均有分布,ASIC3以胞浆和胞膜为主。从免疫荧光密度来看,ASIC3在胞浆和胞膜中的表达量最多,ASIC2a次之,ASIC1最少。④在培养和急性分离的心肌细胞上均记录到不同类型阿米洛利敏感的ASIC电流,该电流呈pH依赖性,pH50为5.73±0.18。结论心肌组织和细胞上存在各种功能性ASICs的表达,该发现将为进一步探讨药物作用的靶点提供新的思路。更多还原