黄皮酰胺的一对光学对映体A、B对Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡的保护作用

【作者】 胡金凤； 宁娜； 苑玉和； 张均田； 陈乃宏；

【机构】 中国医学科学院药物研究所；

【摘要】 现代药理学方法验证手性化合物黄皮酰胺可能具有保护神经细胞、改善老年痴呆模型认知障碍的作用。A、B是其中一对光学异构体。对不同旋光度的光学异构体进行比较分析,可为开发有效低毒的神经细胞保护剂提供参考。目的观察黄皮酰胺的一对光学对映体A、B对Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡的影响。方法采用MTT法观察了对映体A、B对Aβ25-35造模后PC12细胞存活率的影响;采用Hochest33258/PI双重染色及流式细胞仪术对细胞凋亡进行观察检测;并采用Western blot方法测定了凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax表达及Akt磷酸化的变化。结果10μM Aβ25-35作用PC12细胞36 h后,细胞存活率降低至对照组的51.3%±2.4%,而对映体A在1、10μM剂量下能明显增加PC12细胞的存活率(67.6%±2.4%,70.4%±2.2%),对映体B在1、10μM剂量下也能增加PC12细胞的存活率(57.4%±1.1%,57.5%±2.3%);染色与流式实验发现,化合物A、B在1μM剂量下能减少PI染色细胞数量,改善细胞核月牙状皱缩、碎裂现象,提示对映体A、B有明显的抗凋亡作用;蛋白水平上,对映体A、B给药后,Caspase-3位于17 kD的亚单位的灰度值明显减少,且p-Akt的灰度值明显增加,Bcl-2/Bax比值升高。结论黄皮酰胺的一对光学对映体A、B可能通过抑制Caspase-3凋亡途径、启动细胞存活通路而抑制Aβ25-35诱导PC12细胞的凋亡。更多还原