猪口蹄疫病毒抗体间接ELISA检测试剂盒的研制

【作者】 卢顺； 董晓辉； 张春娟； 郭晓峰； 但汉并； 吴斌；

【机构】 华中农业大学动物传染病实验室；

【摘要】 目的:研制以原核表达蛋白作为包被抗原检测口蹄疫病毒(FMDV)抗体的ELISA试剂盒,为猪口蹄疫病毒抗体的监测提供帮助。方法:利用包含有O型口蹄疫病毒VP1上主要抗原表位的原核表达蛋白作为包被抗原,采用间接ELISA方法确定抗原的最佳包被浓度和血清稀释度,优化各项实验条件,在此基础上研制ELISA检测试剂盒并对试剂盒的特异性、重复性等方面进行了研究。结果:经过研究确定抗原包被浓度为20.75μg/mL,待检血清最佳稀释度为1:40,阴阳性判定界限为0.34。稳定性试验表明批内变异系数和批间变异系数均小于10%。应用该ELISA方法和上海优耐特FMDV VP1 ELISA同时检测220份临床血清,结果显示两者总符合率达87.27%。结论:该ELISA试剂盒可用于口蹄疫血清学流行病调查和抗体水平的监测.更多还原